期刊简介
本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物，已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息，欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿，并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。
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首页>重庆医科大学学报杂志
- 杂志名称：重庆医科大学学报杂志
- 主管单位：重庆市教育委员会
- 主办单位：重庆医科大学
- 国际刊号：0253-3626
- 国内刊号：50-1046/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
自噬在低氧诱导人肾小管上皮细胞凋亡中的作用
杨姗；李冠胜；陈雪梅
关键词：低氧, 人肾小管上皮细胞, 自噬, 凋亡
摘要：目的:探讨自噬在低氧诱导人肾小管上皮细胞株(HK-2)凋亡中的作用.方法:培养HK-2细胞,根据培养环境氧浓度不同分为对照组(21％O2)和低氧组(1％O2);根据低氧培养时间不同,低氧处理细胞进一步分为:低氧6h亚组、低氧12 h亚组、低氧18h亚组和低氧24h亚组.Western blot检测HK-2细胞自噬相关蛋白Beclin1 、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、P62和凋亡相关蛋白活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase3)表达水平,流式细胞仪检测HK-2细胞凋亡情况;采用低氧诱导稳定表达GFP-LC3的HK-2细胞18h,在荧光显微镜下观察GFP-LC3自噬小体的变化;进一步采用低氧联合自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin,RP)或自噬抑制剂巴弗洛霉素A1 (bafilomycin A1,BAfA1)处理HK-2细胞,细胞分为常氧对照组、常氧+雷帕霉素/或巴弗洛霉素组、低氧对照组、低氧+雷帕霉素/或巴弗洛霉素组.Western blot检测Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、P62和cleaved-caspase3表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果:与对照组(0.161±0.043)相比较,低氧12 h[(0.315±0.060),P=0.019]、18h[(0.586±0.063),P=0.000]、24 h[(0.698±0.085),P=0.000]亚组HK-2细胞cleaved-caspase3蛋白表达明显增多;低氧12 h、18h、24 h亚组HK-2细胞凋亡率分别为(23.633±5.346)％、(25.200±4.782)％、(38.567±8.046)％,较对照组(11.800±3.966)％明显增多(P=0.036,P=0.021,P=0.000).同时,低氧18h、24 h亚组HK-2细胞表达Beclin1蛋白[(0.557±0.071),(0.897±0.074)[较对照组(0.249±0.040)明显上调(P=0.001,P=0.000);低氧6h、12 h、18h、24 h亚组细胞表达LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白[(1.795±0.143),(2.873±0.078),(3.029±0.089),(3.735±0.059)]较对照组(1.322±0.191)明显上调(P=0.036,P=0.000,P=0.000,P=0.000);细胞表达自噬底物P62蛋白[(0.776±0.061),(0.602±0.119),(0.419±0.117),(0.384±0.068)]较对照组(0.957±0.035)明显下调(P=0.028,P=0.001,P=0.000,P=0.000);低氧组细胞GFP-LC3斑点计数相对值为(40.667±6.028),较对照组(18.667±5.508)明显增加(P=0.010).雷帕霉素增加自噬后,低氧诱导的HK-2细胞凋亡(26.433±3.402)及cleaved-caspase3蛋白表达(0.265±0.066)较低氧对照组[(36.133±5.856),(0.358±0.060)]明显减少(P=0.012,P=0.000);巴弗洛霉素A1抑制自噬后,低氧诱导的HK-2细胞凋亡增多(49.233±3.412)及cleaved-caspase3蛋白表达(1.242±0.110)较低氧对照组[(25.933±3.650),(0.659±0.060)]明显增加(P=0.000,P=0.000).结论:自噬在低氧诱导的HK-2细胞凋亡中起保护作用.
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