期刊简介
本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物，已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息，欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿，并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。
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首页>重庆医科大学学报杂志
- 杂志名称：重庆医科大学学报杂志
- 主管单位：重庆市教育委员会
- 主办单位：重庆医科大学
- 国际刊号：0253-3626
- 国内刊号：50-1046/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
SH3BP4基因对肝癌细胞迁移和增殖作用的实验研究
郑亚秋；潘琦；梁利；张桂冀；向进；夏杰；汪凯；丁克越；唐霓
关键词：SH3BP4, 肝细胞肝癌, 细胞迁移, 细胞增殖
摘要：目的:构建SH3结构域结合蛋白4 (SH3-domain binding protein 4, SH3BP4) 重组腺病毒载体及shSH3BP4慢病毒载体, 初步探索SH3BP4对肝癌细胞迁移增殖能力的影响.方法:PCR扩增SH3BP4 cDNA序列并构建腺病毒重组质粒pAdEasySH3BP4, HEK293细胞包装重组腺病毒AdSH3BP4;构建SH3BP4基因短发夹型RNA干扰慢病毒载体, 转染至HEK293T细胞, 包装重组慢病毒shSH3BP4.采用Western blot检测SH3BP4在人正常肝脏细胞及肝癌细胞的内源性表达, 将SH3BP4过表达实验部分设为3个组:Mock组、AdGFP组和AdSH3BP4组, Mock组为空白对照组, AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组, AdSH3BP4组为感染腺病毒AdSH3BP4的实验组;将SH3BP4敲低实验部分设为2个组:sh Control组和shSH3BP4组, sh Control组为感染慢病毒sh PLL3.7的对照组, shSH3BP4组为感染慢病毒shSH3BP4的实验组.通过Transwell和划痕实验检测SH3BP4过表达和敲低对肝癌细胞迁移能力的影响;MTS和直接克隆形成实验检测SH3BP4过表达和敲低对肝癌细胞的增殖能力的影响.结果:经限制性内切酶酶切及DNA测序验证, 成功构建AdSH3BP4重组腺病毒载体和shSH3BP4慢病毒载体.Transwell结果表明, AdSH3BP4组 (74.800±0.544) 相较于空白对照组 (219.467±2.640) 与AdGFP组 (210.533±8.498) , 迁移的细胞数明显减少 (P=0.000) ;而shSH3BP4组 (191.467±3.906) ) 比sh Control组 (91.733±2.763) 细胞的迁移数目明显增加 (P=0.000) .划痕实验结果表明, AdSH3BP4组的细胞修复率[ (10.400±0.036) ％]明显低于空白对照组[ (37.500±0.063) ％]与AdGFP组[ (50.000±0.063) ％] (P=0.000) ;而shSH3BP4组[ (55.00±0.05) ％]明显高于sh Control组[ (23.3±0.029) ％] (P=0.000) .MTS结果表明:AdSH3BP4组在96 h的吸光度值 (0.921±0.053) 与空白对照组 (1.091±0.043) 及AdGFP组 (1.062±0.024) 相比明显降低 (P=0.005) .shSH3BP4组在96 h的吸光度值 (1.497±0.020) 与sh Control对照组 (1.142±0.103) 相比明显升高 (P=0.004) .直接克隆形成实验结果表明, AdSH3BP4组的细胞克隆形成数 (34.333±2.082) 相较于空白对照组 (86.333±4.726) 与AdGFP组 (87.333±1.528) 明显减少 (P=0.000) , 而shSH3BP4组 (65.000±6.557) 却明显高于sh Control组 (31.000±2.000) (P=0.001) .上述实验结果说明SH3BP4过表达能显著抑制肝癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力, 而SH3BP4敲低能明显促进肝癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力.结论:SH3BP4可抑制肝癌细胞迁移、侵袭和增殖, 可能为肝癌的诊治提供一个新的靶标.
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