期刊简介
本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物，已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息，欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿，并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。
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首页>重庆医科大学学报杂志
- 杂志名称：重庆医科大学学报杂志
- 主管单位：重庆市教育委员会
- 主办单位：重庆医科大学
- 国际刊号：0253-3626
- 国内刊号：50-1046/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
骨发育相关基因在SEDT中差异表达的研究
胡玉娟；熊丰；朱高慧；罗庆；朱岷
关键词：X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良, 基因芯片, 基因重组病毒
摘要：目的:分别靶向增强和干扰人软骨细胞(human chondrocytes-articular,HC-a)X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良(X-linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDL)基因,骨再生PCR芯片检测细胞内骨发育相关基因表达变化,观察干扰后基因表达谱的变化.方法:分别转入前期构建的靶向增强SEDL的腺病毒质粒pAd5-SEDL和靶向干扰SEDL的慢病毒质粒LV-siSEDL到293T细胞包装成重组腺病毒pAd5-SEDL和重组慢病毒LV-siSEDL,扩增重组腺病毒,收集病毒液,检测病毒滴度.将重组腺病毒、重组慢病毒以适感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别感染HC-a,实验分4组:增强组(HC-a/pAd5-SEDL,重组腺病毒pAd5-SEDL感染HC-a增强SEDL基因表达)、增强阴性对照组(HC-a/空载体(pAd5),空白腺病毒pAd5感染HC-a作阴性对照)、干扰组(HC-a/LV-siSEDL,重组慢病毒LV-siSEDL感染HC-a干扰SEDL基因表达)、干扰阴性对照组(HC-a/空载体(LV),空白慢病毒LV感染HC-a作阴性对照),通过QPCR检测HC-a中SEDL基因表达、Western blot检测HC-a中sedlin蛋白表达,验证是否成功干扰或增强SEDL基因表达,收集4组细胞mRNA进行骨再生PCR芯片(含84个基因)检测.结果:(1)收获高滴度重组腺病毒pAd5-SEDL,病毒滴度为2.6×1011 pfu/ml.并使重组腺病毒pAd5-SEDL和重组慢病毒LV-siSEDL成功感染HC-a.(2)HC-a SEDL基因表达量中增强组(2.14±0.36)较增强阴性对照组(1.21±0.25)增高(-0.022),干扰组(0.86±0.11)较干扰阴性对照组(1.34±0.06)降低(P=0.003);sedlin蛋白表达量中,增强组(0.56±0.04)较增强阴性对照组(0.37±0.05)增高(P=0.006),干扰组(0.13±0.02)较干扰阴性对照组(0.36±0.04)降低(P=0.001).(3)基因芯片结果:HC-a内SEDL基因干扰后,芯片结果显示:基因上调21个,下调5个.HC-a内SEDL基因增强后,骨再生PCR芯片结果显示:基因上调27个,下调12个.干扰组的差异表达基因中,在增强组中呈反向变化,且与软骨发育相关的基因有5个:COL2A、BMP3、FLT1、GDF10、IGF1.结论:通过增强及沉默软骨细胞内SEDL基因,发现骨发育相关基因中COL2A、BMP3、FLT1、GDF10、IGF1出现差异表达,可能与SEDL基因有关联.
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