期刊简介

               本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物,已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息,欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿,并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。                

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  • 杂志名称:重庆医科大学学报杂志
  • 主管单位:重庆市教育委员会
  • 主办单位:重庆医科大学
  • 国际刊号:0253-3626
  • 国内刊号:50-1046/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录:上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
重庆医科大学学报杂志2015年第01期

胚胎中脑神经干细胞的培养及分化条件探讨

晋贞超;邓小兰;刘品月;袁莉;姜蓉;王健;王亚平;郑敏

关键词:神经干细胞, 细胞培养, 分化, 白血病抑制因子
摘要:目的:探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的培养方法以及各种条件对NSCs生长状况的影响.方法:取SD大鼠胚胎中脑,在含细胞因子碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和内皮细胞生长因子(epidermal growthfactor,EGF)的无血清培养基中培养扩增,得到的神经球用神经巢蛋白nestin抗体鉴定和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-de-oxy uridine,Brdu)掺入检测增殖能力.血清诱导分化后用免疫荧光做星形胶质细胞酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经元特异性Ⅲ型微管蛋白(neuron-specific classⅢβ-tubulin,β-Ⅲ-tublin)的双标检测.研究进一步观察了细胞因子bFGF和EGF单用及合用对克隆形成数量的影响及不同接种密度和白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)对细胞生长的影响.结果:神经球nestin免疫荧光表达显示强阳性;Brdu掺入实验显示神经球细胞具有很好的增殖能力;分化后免疫双标结果得到了GFAP(68.32±5.70)%和β-Ⅲ-tublin(21.65±3.40)%的阳性表达;当2种因子同时存在时细胞克隆数量优于单因子作用组(P< 0.05,与EGF组比较;P<0.01,与bFGF组比较);与对照组比较LIF作用组细胞数量明显增多(F=2 630.114,P=0.000);细胞接种密度对神经球的数量有明显影响(F=155.100,P=0.001),在(0.5~16.0)×105个/ml密度范围内,神经球数量随着接种密度增加而增加.结论:bFGF和EGF 2种细胞因子对NSCs的生长是必须的;长期传代过程中LIF能促进NSCs的生长;NSCs生长有密度依赖性,但接种密度应该控制在适宜范围内.