期刊简介
本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物，已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息，欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿，并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。
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首页>重庆医科大学学报杂志
- 杂志名称：重庆医科大学学报杂志
- 主管单位：重庆市教育委员会
- 主办单位：重庆医科大学
- 国际刊号：0253-3626
- 国内刊号：50-1046/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
金黄色葡萄球菌重组表皮剥脱毒素A的原核表达
王毅；肖异珠；杨致邦；欧阳莹；李咏梅；罗晓燕
关键词：金黄色葡萄球菌, 葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征, 表皮剥脱毒素A, 原核表达
摘要：目的:通过基因工程技术获取重组表皮剥脱毒素A (recombine exfoliative toxin A,rETA),为深入研究表皮剥脱毒素的致病机制提供实验材料.方法:根据GenBank公布的ETA基因序列设计引物,从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)基因组中扩增ETA基因,插入原核表达载体pQE30,构建重组质粒pQE30-ETA.将pQE30-ETA转化表达菌E.coli M15,优化诱导表达条件,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western blot鉴定.重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后,注入BALB/C小鼠皮下,观察皮肤病理改变,鉴定重组蛋白的生物学活性.结果:重组质粒pQE30-ETA序列分析显示插入的基因片段全长927 bp,与基因文库中的ETA序列完全吻合.SDS-PAGE分析显示表达产物相对分子量约为27 kD,在IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时间4h,可得到大表达量的可溶性蛋白,约为20％.Western blot显示与S.aure us产生的ETA蛋白在同一位置,重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后蛋白纯度达90％以上,注射重组蛋白的小鼠表皮内出现水疱和裂隙.结论:成功构建了重组质粒pQE30-ETA,表达了具有生物学活性的重组S.aureus表皮剥脱毒素A.
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