期刊简介

               本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物,已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息,欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿,并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。                

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  • 杂志名称:重庆医科大学学报杂志
  • 主管单位:重庆市教育委员会
  • 主办单位:重庆医科大学
  • 国际刊号:0253-3626
  • 国内刊号:50-1046/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录:上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
重庆医科大学学报杂志2014年第07期

乙型肝炎病毒全基因组1.3倍体重组腺病毒的构建与表达

曹漪伊;曲嘉琳;杨庆;万雪梅;唐颖慧;蒋菁容;汤华

关键词:乙肝病毒, 腺病毒, 感染, 乙型肝炎S蛋白
摘要:目的:构建乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)重组腺病毒,为HBV的相关研究提供一种高效率、便捷的实验手段.方法:将HBV1.3倍体的片段构建到pAdTrack-TO4穿梭载体上,再经限制性核酸内切酶PmeⅠ线性化后转入含有腺病毒骨架载体pAd-Easy1的BJ5183感受态中进行重组并鉴定.鉴定正确后的重组腺病毒质粒经PacⅠ线性化后转染入HEK-293细胞进行病毒包装,获取HBV1.3倍体的重组腺病毒(Ad-HBV1.3).通过荧光显微镜进行感染效率的检测;用ELISA、Western blot方法在蛋白水平检测HBV蛋白表达情况;小鼠尾静脉注射HBV1.3倍体的重组腺病毒,检测经腺病毒感染后的小鼠体内HBV表达情况.结果:在Ad-HBV1.3腺病毒感染后,细胞的感染效率可达到95%以上;ELISA实验检测实验组乙型肝炎s蛋白(hepatitis B virus S protein,HBs)、乙型肝炎e蛋白(hepatitis B virus E protein,HBe)表达量明显高于对照组;Western blot结果显示感染Ad-HBV1.3腺病毒后可有高水平的HBs表达;动物实验显示小鼠在注射Ad-HBV1.3腺病毒后体内HBs在第3天即可开始表达,5d达到峰值,7d后逐渐下降.结论:本研究成功构建了可表达HBV的重组腺病毒,其感染效率可高达95%,为HBV相关研究提供一种简单高效的研究手段.