期刊简介
本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物，已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息，欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿，并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。
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首页>重庆医科大学学报杂志
- 杂志名称：重庆医科大学学报杂志
- 主管单位：重庆市教育委员会
- 主办单位：重庆医科大学
- 国际刊号：0253-3626
- 国内刊号：50-1046/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
肺炎链球菌热休克蛋白GrpE的表达、纯化及热稳定性研究
张宏鹏；赵沙沙；龙小滨；吴爽；白垒；罗淼；黄爱龙；汪德强
关键词：肺炎链球菌, 热休克蛋白GrpE, 蛋白质表达纯化, 热稳定性
摘要：目的:肺炎链球菌可引起细菌性肺炎和脑膜炎、发热性菌血症等多种疾病.对肺炎链球菌热休克蛋白GrpE进行克隆表达,纯化及热稳定性测定,以便于进一步分析肺炎链球菌感染的分子机制.方法:利用PCR技术扩增GrpE基因,构建重组质粒pW28-GrpE,并在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)B834中表达,Ni2+-NTA亲和层析柱和DEAE阴离子交换层析柱纯化GrpE蛋白,Hiload Superdex 75凝胶层析柱分析在溶液中的聚集状态,热稳定性(thermal shift assay,TSA)法测定热稳定性.结果:①成功构建重组质粒pW28-GrpE,在表达菌E.coli B834中可溶性表达.②获得高纯度(95.0％以上)GrpE蛋白,发现该蛋白在溶液中以二聚体形式存在.③测定GrpE蛋白在pH 6.0、20 mmol/L盐浓度缓冲液中有较高热稳定性.结论:利用经典的蛋白质克隆表达纯化技术,获得了高表达量高纯度的GrpE蛋白,并初步测定其热稳定性为下一步蛋白晶体培养、三维结构解析及感染机制研究提供重要基础.
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