期刊简介

               本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物,已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息,欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿,并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。                

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  • 杂志名称:重庆医科大学学报杂志
  • 主管单位:重庆市教育委员会
  • 主办单位:重庆医科大学
  • 国际刊号:0253-3626
  • 国内刊号:50-1046/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录:上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
重庆医科大学学报杂志2013年第04期

真核表达载体pcDNA3.1(-)-IL-3-PE38KDEL的构建及其在CIK细胞中的表达

李小芳;沈燕;娄世锋;刘杞;张萍;白凤霞

关键词:白细胞介素-3, 细胞因子诱导的杀伤细胞, 真核表达
摘要:目的:构建人白细胞介素-3(interleukin-3,IL-3)和铜绿假单胞菌外毒素(pseudomonas exotoxin,PE)衍生物(PE38KDEL)基因的真核融合表达载体,研究其在细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞中的表达情况.方法:通过PCR获得实验需要的IL-3-PE38KDEL基因片段,构建IL-3-PE38KDEL融合基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-IL-3-PE38KDEL.重组质粒经限制性内切酶及DNA序列测定证实构建成功后,用Liprofectamine2000脂质体转染CIK细胞,然后用RT-PCR及Western blot检测IL-3-PE38KDEL融合蛋白在CIK细胞的表达,用MTS检测细胞上清中融合蛋白的细胞毒作用.结果:酶切分析及DNA序列测定证实,IL-3-PE38KDEL融合基因被成功克隆入真核表达质粒载体pcDNA3.1(-);RT-PCR及Western blot法检测证实重组基因可在CIK细胞中表达,且表达的融合蛋白对HL60细胞有杀伤活性.结论:IL-3-PE38KDEL融合基因可在CIK细胞中表达,为进一步研究融合毒素IL-3-PE38KDEL联合CIK细胞过继免疫治疗对肿瘤细胞的体内外杀伤作用奠定了基础.