期刊简介
本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物，已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息，欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿，并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。
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首页>重庆医科大学学报杂志
- 杂志名称：重庆医科大学学报杂志
- 主管单位：重庆市教育委员会
- 主办单位：重庆医科大学
- 国际刊号：0253-3626
- 国内刊号：50-1046/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
肿瘤特异性启动子Survivin调控shRNA腺病毒的构建及对HepG-2细胞中CD133基因表达的抑制
李芳；邹冬玲；曹姝；李少林
关键词：survivin, CD133, 小发夹RNA, 肝癌
摘要：目的:构建肿瘤特异性启动子Survivin驱动的小发夹RNA(shRNA),通过下调HepG-2肝癌细胞中CD133的表达,探讨其对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:①构建pEntr-Surp-shRNA真核表达载体,转染HepG-2肝癌细胞,Hela细胞,293T细胞.②设计shRNA干扰片段,筛选干扰佳干扰效率的CD133干扰片段,重组载体pAd.Surp-shRNA972,pAd.SurpshRNA2377,pAd.Surp-shRNA485并筛选出稳定表达shRNA的转染克隆.③Ad.Surp-shRNA972,Ad.Surp-shRNA2377,Ad.SurpshRNA485腺病毒分别转染HepG-2肝癌细胞株,建立Ad.Surp-shRNA972,Ad.Surp-shRNA2377,Ad.Surp-shRNA485实验组,未转染腺病毒组为空白组.感染肝癌细胞株,应用RT-PCR和Western blot检测CD133 mRNA和蛋白的表达,MTT法和Transwell法检测细胞体外增殖和侵袭能力.结果:①成功构建了Survivin启动子调控的shRNA真核表达载体pEntr-Surp-shRNA,在293T细胞株无荧光,而在Hela、HepG-2细胞株中荧光表达明显,证实Survivin具有肿瘤特异性.②成功包装Ad.SurpshRNA972,Ad.Surp-shRNA2377,Ad.Surp-shRNA485腺病毒.③RT-PCR和Western blot检别显示Ad.Surp-shRNA972、Ad.SurpshRNA2377,有封闭CD133 mRNA和蛋白表达的效果;计算实验组与空白组相比mRNA抑制率分别为(63.44±0.02)％、(56.98±0.03)％;Ad.Surp-shRNA972、Ad.Surp-shRNA2377、Ad.Surp-shRNA485组蛋白抑制率分别为(55.43±0.40)％、(48.65±0.20)％、(34.67±0.40)％;实验组细胞的增殖和侵袭能力也受到明显抑制,Ad.Surp-shRNA972组生长抑制率为(72.88±0.74)％,Ad.Surp-shRNA2377组生长抑制率为(59.90±0.87)％,Ad.Surp-shRNA485组生长抑制率为(30.18±0.95)％.结论:肿瘤特异性启动子Survivin调控腺病毒介导的shRNA能显著下调CD133基因的表达,抑制肝癌细胞株HepG-2的增值和减弱其侵袭力.
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