期刊简介
本刊是由重庆医科大学主办的综合性医学专业性学术刊物，已被《中文科技期刊数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中国科技论文统计源期刊》、《中国生物文摘》、《中国生物学文献数据库》全文收录。通过论著、临床研究及短篇报道等栏目刊登基础医学、临床医学等相关内容。为了更好地反映国内外最新科研成果及医药信息，欢迎从事医学卫生事业的人员踊跃投稿，并优先考虑属国家、省、市科研基金项目的论文。
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首页>重庆医科大学学报杂志
- 杂志名称：重庆医科大学学报杂志
- 主管单位：重庆市教育委员会
- 主办单位：重庆医科大学
- 国际刊号：0253-3626
- 国内刊号：50-1046/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：被《中文科技期刊数据库》收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中)
人重组蛋白nm23-H1突变体原核表达纯化与鉴定
杨雪琴；周清华；王东；王阁；马力；朱大兴
关键词：nm23-H1, 突变, 原核表达
摘要：目的:构建nm23-H1的S120G,S120G-P96S及$44A突变体原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化.方法:通过PCR方法扩增突变型nm23-H1目的片段,利用基因重组技术构建pET28a-nm23-H1突变型原核表达载体,并进行酶切和测序鉴定,鉴定正确克隆转化BL21(DE3)溶源菌,进行蛋白表达及可溶性分析,同时采用NI-NTA镍柱亲和层析法进行纯化,应用Western blot方法对纯化后蛋白进行鉴定检测.结果:通过酶切和测序鉴定,pET28a-nm23-H1突变型原核表达载体序列正确,编码框正确.转化溶源菌后能够表达目的蛋白,蛋白表达量高;其中,S44A为可溶性表达,S120G以可溶性表达为主,少部分为包涵体表达,而S120G-P96S则大部分为包涵体表达;Western blot检测结果提示3个突变型nm23-H1蛋白分子量均为20 kD,与预计值相符.结论:成功构建nm23-H1的S120G,S120G-P96S及S44A突变体原核表达载体,S120G和S44A蛋白可以用于下一步实验研究,而S120G-P96S突变体则可能不适于下一步研究.
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